熒光顯微鏡濾光片是熒光顯微鏡系統(tǒng)中的重要組件，其主要功能是選擇性地透過或反射激發(fā)光和熒光光之間的波長差異。這些濾光片可以顯著提高圖像的對比度和清晰度，使得研究者能夠更準確地觀察和分析樣品。

無論用什么顯微鏡，要得到準確的實驗結(jié)果和實驗數(shù)據(jù)，都離不開熒光染料正確設置激發(fā)和發(fā)射波長，熒光染料所需的激發(fā)光和釋放的熒光都是特定波長的，所以需要利用各種濾色片來選擇性的透過某種特定波長的光來實現(xiàn)熒光觀察。否則就會出現(xiàn)激發(fā)不了，或者激發(fā)了卻看不到或串色的現(xiàn)象。所以選擇合適的濾色片至關重要！

顯微鏡觀察的熒光一般包括紫外、紫藍綠色光兩種色光，常見的濾光片類型為長波濾光片或帶通濾光片，在熒光顯微鏡的光學組件中，涉及光學鏡片一般分為激發(fā)濾光片、分色鏡（也叫二向色鏡）、發(fā)射濾光片，激發(fā)濾光片負責可通過的激發(fā)熒光波長激發(fā)，分色鏡負責精確傳遞小范圍顏色光同時反射激發(fā)光，一般而言，激發(fā)光波長短于發(fā)射光波長，反射濾光片通過反射光阻擋其他雜散光和激發(fā)光的反射光，進而透射到人眼。

按功能分：

激發(fā)濾光片（Excitation Filter）：選擇性地透過激發(fā)光的波長范圍，通常是藍色或紫色。其作用是激發(fā)樣品中的熒光染料，使其產(chǎn)生熒光信號。常見的激發(fā)濾光片波長范圍在400-500 nm之間。

二向色鏡（Dichroic Mirror）：選擇性地反射激發(fā)光的波長，同時透過樣品發(fā)出的熒光光信號。二向色鏡濾光片的波長范圍通常在500-550 nm之間。

發(fā)射濾光片（Emission Filter）：選擇性地透過樣品發(fā)出的熒光光信號，同時阻擋非特異性的背景熒光。發(fā)射濾光片的波長范圍取決于所使用的熒光染料。

熒光顯微鏡中各個波段的所需濾光片的發(fā)射波長和激發(fā)波長參考

熒光顯微鏡濾光片通常可以按照不同的分類方式進行劃分：

按使用目的分：

通用型：適用于觀察細胞、細菌、病毒等一般生物樣品。

專用型：針對特定研究需求設計，如研究生物大分子結(jié)構(gòu)。

科研用：具備更高的精度和靈敏度，適用于深入的科學研究。

按材料分：

石英玻璃：具有優(yōu)異的光學性能和穩(wěn)定性。

硅酸鹽玻璃：成本較低，但光學性能略遜于石英玻璃。

氟化物玻璃：在某些特定波長范圍內(nèi)具有出色的透過性。

選擇與應用

在選擇熒光顯微鏡濾光片時，需要考慮以下幾個因素：

熒光染料的發(fā)射波長：濾光片的波長范圍應與熒光染料的發(fā)射波長相匹配，以確保最佳的熒光信號檢測效果。

研究目的：不同的研究目的可能需要不同類型的濾光片組合。例如，對于高靈敏度的檢測任務，可能需要選擇具有更高截止深度和更窄帶寬的濾光片。

顯微鏡類型：不同類型的熒光顯微鏡（如透射式、落射式等）可能需要不同的濾光片配置。

在實際應用中，需要根據(jù)具體情況合理選擇和搭配濾光片。例如，在透射熒光顯微鏡中，濾光片的順序通常為吸熱濾光片、激發(fā)濾光片組合、被檢標本和阻擋濾光片。而在落射熒光顯微鏡中，則需要在激發(fā)濾光片和被檢標本之間加入色光分離反射濾光片。

價格與供應

熒光顯微鏡濾光片的價格因品牌、型號、規(guī)格和供應商而異。市場上存在多種品牌和型號的濾光片供選擇，價格從幾元到幾百元不等。在購買時，建議根據(jù)實際需求和預算進行選擇，并選擇信譽良好的供應商進行采購。

綜上所述，熒光顯微鏡濾光片是熒光顯微鏡系統(tǒng)中不可或缺的重要組件。通過合理選擇和搭配濾光片，可以顯著提高熒光顯微鏡的成像效果和研究效率。